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100
Auswerteverfahren
Eppendorf BioSpectrometer® basic
Deutsch (DE)
12.5.4
Berechnung des Faktors für Protein in "General Method Parameter"
Dieser Abschnitt gilt nur für Berechnung der Proteinkomponente in den Methodengruppen Dye labels und
Proteins direct UV. Bei diesen Methodengruppen wird in den Parametern die Proteinkomponente
ausgewählt (siehe Methodenparameter auf S. 35). Der Proteinkomponente ist ein Faktor zugeordnet, der in
der Funktion General Method Parameter/Proteins für jedes Protein eingegeben wird. Alternativ zur
Eingabe des Faktors kann entweder A0.1% oder der Extinktionskoeffizient plus die Molmasse des Proteins
eingegeben werden. In diesem Fall wird der Faktor wird wie folgt berechnet:
FP
1
A0.1%
F = Faktor für das Protein; Einheit: g/L.
A0.1% = Extinktion des Proteins bei einer Konzentration von 0,1 % (1 g/L).
Bei Eingabe des molaren Extinktionskoeffizienten und der relativen Molmasse des Proteins kann A0.1%
hieraus berechnet werden:
A0.1%
HP
MM P
εP = molarer Extinktionskoeffizient des Proteins; Einheit: cm-1M-1.
MMP = relative Molmasse des Proteins; Einheit: Da (Eingabe in General Method Parameter in kDa).
12.6
Spezielle Auswerteverfahren für die Dye-Methoden
12.6.1
Berechnung des Faktors für den Farbstoff aus dem Extinktionskoeffizienten
Bei den Dye-Methoden wird die Konzentration des Farbstoffs mit einem Faktor aus der gemessenen
Extinktion errechnet (siehe Auswertung mit Faktor oder Standard auf S. 95). Der Faktor wird in der Funktion
General Method Parameter/Dyes für jeden Farbstoff eingegeben. Alternativ zur Eingabe des Faktors kann
der Extinktionskoeffizient eingegeben werden. In diesem Fall wird der Faktor wird wie folgt berechnet:
FDye
106
H Dye
F = Faktor für den Farbstoff; Einheit: pmol/μL.
ε = Extinktionskoeffizient für den Farbstoff; Einheit: cm-1Mol-1L.