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DRG Prolactin ELISA EIA-1291
Deutsch
1 EINLEITUNG
Der DRG Prolactin ELISA wird zur quantitativen Bestimmung von Prolaktin in Serum eingesetzt.
Nur für In-vitro Diagnostik.
KLINISCHE BEDEUTUNG
Prolaktin ist ein Polypeptidhormon mit einem Molekulargewicht von ungefähr 23.000 Dalton, das von dem
Hypophysenvorderlappen ausgeschieden wird. Prolaktinspiegel werden vom Hypothalamus durch einen negativen
Feedback-Mechanismus reguliert, der mit einem Prolaktin-Hemm-Faktor (PIF - wahrscheinlich Dopamin) und
einem Prolactin Releasing Factor (PRF - zur Zeit noch nicht vollständig charakterisiert) arbeitet. Obwohl sein
Vorhandensein schon 1928 vermutet wurde, wurde Prolaktin erst 1971 als ein vom Wachstumshormon (hGH)
unabhängiges Hormon erkannt
Serumprolaktin besteht aus drei verschiedenen für den Immunoassay geeigneten Formen:
1. einem Einzelstrang Polypeptidhormon mit einem Molekulargewicht von ungefähr 23.000 Dalton Anteil am
zirkulierenden Hormon bis zu 85 %.
2. einem Dimeren ("big" Prolaktin) mit ungefähr 56.000 Dalton, Anteil am zirkulierenden Hormon bis zu 20%.
3. einem Polymer ("big big" Prolaktin~ mit ungefähr 160.000 Dalton, Anteil am zirkulierenden Hormon bis
zu 20%.
Obwohl alle drei Formen für den Immunoassay geeignet sind, wird nur das Monomer für biologisch aktiv gehalten.
Der schwerwiegendste Grund für eine Hyperprolaktinämie ist ein Adenom des Hypophysenvorderlappens. Die
Bestimmung von Serumprolaktin ist bei der Diagnose dieser Tumore sehr nützlich. Obwohl sie meistens gutartig
sind, produzieren sie abnormale Mengen von Prolaktin, und zwar in 80 % der Fälle. Andere Krankheiten, die durch
erhöhte Prolaktin-Spiegel angezeigt werden, sind Schilddrüsenunterfunktion, hypothalamische Erkrankungen,
Stein-Leventhal-Syndrom und chronisches Nierenversagen.
Hyperprolaktinämie kann auch eine sekundäre Auswirkung sein, wenn Phenothiazine, Monoaminoxidaselnhibitoren und andere Medikamente eingenommen werden, die die Funktion des Hypothalamus und der
Nebenniere beeinflussen. Auch während oder kurz nach dem Absetzen der Einnahme von oralen Kontrazeptiva
kann Hyperprolaktinämie auftreten. Hypoprolaktinämie ist nicht vollständig an spezifisch klinische Probleme
gebunden, obwohl Versagen der postpartalen Laktation und einige Fälle von Panhypopituitarismus mit einem
verringerten Prolaktin-Spiegel in Verbindung gebracht werden können.
2 TESTPRINZIP
Der DRG Prolactin ELISA ist ein Festphasen-Enzymimmunoassay, der auf der Sandwichtechnik basiert.
Die Wells der Mikrotiterplatten sind mit einem monoklonalen Antikörper beschichtet, der gegen eine definierte
Antikörper-Bindungsstelle des Prolaktin-Moleküls gerichtet ist.
Die Proben werden in die beschichteten Wells gegeben und mit einem Enzymkonjugat inkubiert. Das Konjugat
enthält einen anti-Prolaktin-Antikörper, der mit Meerrettichperoxidase konjugiert ist. Es wird ein Sandwichkomplex
gebildet.
Das nicht gebundene Konjugat wird durch Waschen der Wells entfernt. Anschließend wird die Substratlösung
zugegeben und die Farbentwicklung nach einer definierten Zeit gestoppt. Die Intensität der gebildeten Farbe ist
proportional der Prolaktin-Konzentration in der Probe. Die Extinktion wird bei 450 nm mit einem
Mikrotiterplattenleser gemessen.
Vers. 8.0
Effective 2013/12 - vk
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