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ENR-CLQ 22 FICHE TECHNIQUE Date: 22/10/2008 Révision : 00 Page : 1 sur 2 SANG STERILE PRESENTATION Milieu prêt à l’emploi : • Coffret de 10 Flacons 20ml (Réf. SF02107) • Coffret de 5 Ampoules 7ml (Réf. SA10107) DEFINITION Le sang stérile entre dans la composition de certains milieux de culture : Soit, comme facteur d’enrichissement, pour la préparation de géloses destinées à la culture de bactéries exigeantes • Soit, pour l’étude du pouvoir hémolytique de certaines d’entre elles, les streptocoques en particulier • CONSERVATION Les flacons et les ampoules se conservent pendant 15 jours entre 2°C et 8°C jusqu’à la date de péremption. MODE D’EMPLOI Gélose au sang frais : • Faire fondre la gélose au bain-marie bouillant sécurisé (environ 45min) • Refroidir et maintenir à 47°C dans un bain marie thermostaté. • Ajouter le contenue d’une ampoule soit 7 ml de sang à 100ml de gélose de base stérile maintenue à la température de 45-50°C, puis agiter et couler en boites de pétri Gélose au sang cuit : • Faire fondre la gélose au bain-marie bouillant sécurisé (environ 45min) • Refroidir et maintenir à 47°C dans un bain marie thermostaté. • Ajouter le contenue d’une ampoule soit 7ml de sang à un flacon de 100ml de gélose de base stérile et porter au bain marie à 80°C pendant 5 minutes jusqu’à obtention d’une teinte chocolat. • Agiter et couler en boites de pétri. La gélose au sang cuit libère des facteurs (hémine en particulier) favorables à la croissance des Haemophilus et des Neisseria. ENR-CLQ 22 FICHE TECHNIQUE Révision : 00 Page : 2 sur 2 CONTROLE QUALITE Analyses microbiologiques : La stérilité du sang est contrôlée avec le bouillon cœur cervelle Contrôle de la stérilité avec le bouillon cœur cervelle Absence de prolifération et de coagulation après incubation 24h à 37°C Microorganismes Culture en 24-48h à 37°C Gélose au sang additionnée de sang Staphylococcus aureus ATCC 25923 Strptococcus pyogène ATCC 19615 Bonne croissance : Hémolyse β Croissance : Hémolyse β Gélose chocolat vitalex Staphylococcus aureus ATCC 25923 Escherichia coli ATCC 25922 Bonne croissance Bonne croissance Date: 22/10/2008