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Capitolo 2: Stato dell’arte
della tunica media, in quanto questo fenomeno si è verificato anche sotto le altre condizioni
di perfusione. Gli autori hanno concluso, quindi, affermando che pressione e shear stress
agiscono in modo indipendente sul rimodellamento vascolare.
Nel lavoro di Saucy [4] del 2010 è stata descritta e utilizzata l’evoluzione del sistema
EVVSS già descritto nel lavoro di Rey [33]; questo sistema è stato modificato al fine di
generare una perfusione di tipo pulsatile, controllata mediante PC (Figura 2.31).
Figura 2.31 Schema del sistema di coltura ex vivo: pompa (1), computer (2), sensore di pressione (3), flussimetro (4),
controllore dell’attuatore che impone la pressione (5), camera di coltura (6).
Gli esperimenti sono stati condotti su segmenti di vena safena umana derivanti da
interventi di bypass agli arti inferiori; da ogni vena sono stati ottenuti tre campioni, uno
conservato per il controllo statico e due sottoposti a perfusione per 7 e 14 giorni. Sono
state imposte condizioni di tipo arterioso e cioè elevati valori di shear stress (0.9-1.5 Pa),
flusso pulsatile (frequenza 1 Hz) con portata media di 120 ml/min, e pressione sistolicadiastolica di 80-40 mmHg. Dall’analisi della risposta vasomotoria non è emersa differenza
significativa tra i campioni di controllo e i perfusi; questo conferma il mantenimento della
contrattilità delle SMC dopo 14 giorni di coltura. La presenza delle SMC è stata inoltre
confermata,
in
tutti
i
gruppi
sperimentali,
dalla
colorazione
α-SMA.
Analisi
immunoistochimiche per il marcatore delle EC CD31 hanno mostrato il mantenimento di
uno strato di EC durante l’intero periodo di coltura (Figura 2.32). Colorazioni per Ki-67
(Figura 2.33) hanno mostrato l’assenza di fenomeni proliferativi nei campioni di controllo,
mentre, per quanto riguarda i campioni perfusi con flusso pulsatile, questi fenomeni sono
molto evidenti nello strato intimale, con un indice di proliferazione di circa 8.2%.
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