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problema possibile causa rimedio Bands sono inclinate o distorte Gel preparazione incompleta e di polimerizzazione Degas l'impilamento-gel soluzione ed evitare bolle d'aria sotto i denti del pettine. Interfaccia irregolare tra stacking e l'esecuzione di gel Sovrapporre il gel esecuzione con acqua satura-butanolo comincia prima della polimerizzazione, per evitare la formazione di una superficie irregolare gel. Preparazione del campione Dializzare o desalificare del campione. Campione Stained raccoglie: Vicino alla parte anteriore del buffer Vicino alla parte superiore del gel quando il fronte di buffer ha raggiunto il fondo Gel concentration Le molecole non sono sufficientemente limitata dalle dimensioni del gel risoluzione dei pori: aumentare la% T. Degradation Le proteine possono essere degradata da proteasi endogene: utilizzare gli inibitori delle proteasi durante la fase di isolamento. Gel concentration La dimensione dei pori gel è troppo piccola: diminuire il T% del (o sovrapposizione) gel risolvere. Precipitation La proteina è precipitata. Riscaldare il campione ad una temperatura inferiore (70 °C o meno) per 1-2 min. A sia superiore e Gel concentration inferiore del gel Monitoraggio Poor impilamento colorante non affinare in una zona concentrata nel gel di impilamento Qualità del reagente Preparazione del campione L'intervallo di peso molecolare del campione richiede un gradiente di concentrazione di acrilamide per risolvere l'intera gamma di dimensioni proteiche. Versare un gel più alto impilamento. (Per ottenere risultati ottimali, permettono un impilamento-gel altezza di 2,5 volte l'altezza del campione nel pozzo.) Smaltire le soluzioni obsolete di acrilammide e usare solo il più alto grado di acrilammide. Durante la preparazione dei campioni, evitare di utilizzare soluzioni con elevate concentrazioni saline. • p27
