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Simplexa™ EBV Página 2 Descrição do componente Componente Descrição Primers fluorescentes marcados com corante para quantificação de EBV e controle interno Fluoróforo da sonda (Corante) Excitação Emissão Gene- alvo EBV FAM 495 nm 520 nm Gene Lmp2A Controle interno Q670 644 nm 670 nm Gene de A. thaliana Alvo Simplexa™ EBV Primer Mix (PM) (Mistura de primers) Simplexa™ Master Mix (MM) (Mistura de reagentes) Simplexa™ Extraction & Amplification Control DNA (IC) (DNA de controle para extração e amplificação) Simplexa™ EBV Low Positive Control (LPC) (Controle positivo baixo) Simplexa™ EBV High Positive Control (HPC) (Controle positivo alto) Simplexa™ EBV Barcode Card (Cartão de código de barras) DNA polimerase, tampão e desoxinucleotídeos trifosfato (dNTPs) Fragmento de DNA com 577 pares de bases derivado do gene que codifica a unidade maior da ribulose-1,5-bisfosfato carboxilase oxigenase (N-metiltransferase) da planta Arabidopsis thaliana. EBV inativado em matriz de base humana. EBV inativado em matriz de base humana. Parâmetros específicos do teste. MATERIAIS NECESSÁRIOS MAS NÃO FORNECIDOS 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. Padrões de Quantificação Simplexa™ EBV ( REF MOL2410) Ciclador 3M Integrated Cycler com o aplicativo Integrated Cycler Studio versão 3.0 ou superior Universal Discs para uso com o ciclador integrado Fita de cobertura de disco universal a Sistema Roche MagNA Pure LC e material de consumo associado. a Roche MagNA Pure LC Total Nucleic Acid Isolation Kit (Roche Cat. N.º 03038505001) b Equipamento bioMérieux NucliSENS® easyMAG™ e material de consumo e reagentes associados b Pipeta multicanal Biohit/bioMérieux b Placa em tira para ELISA Micropipeta(s) individual(is) do tipo multicanal e/ou de repetição com exatidões entre 1-10 µl, 10-100 µl e 100-1.000 µl Freezer (degelo manual) a temperaturas entre -10 e -30°C (para o armazenamento dos componentes congelados do kit) Refrigerador a temperaturas entre 2 ºC e 8 °C (para amostras e componentes descongelados do kit) Capela de biossegurança (fluxo laminar) para processamento de amostras Microcentrífuga Misturador de vórtex Ponteiras para micropipetadores, estéreis, descartáveis, que não contenham RNase/DNase, com proteção contra aerossóis. Suportes e tubos de polipropileno de 1,5 ml para microcentrífuga (tubos sem RNase/Dnase são recomendados mas não obrigatórios) 18. Luvas descartáveis sem talco 19. Água sem nuclease (para extração e como Controle sem molde (NTC, No Template Control)) 20. Suportes de resfriamento para tubos de microcentrífugas de 1,5 ml a Para uso com o método de extração Roche MagNA Pure LC b Para uso com o método de extração bioMérieux easyMAG VALIDADE E MANUSEIO 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Armazene os reagentes a temperaturas entre -10 e -30 ºC (não utilize congeladores do tipo frost-free). Antes do uso, deixe os reagentes descongelarem à temperatura ambiente (entre 18 e 25 °C, aproximadamente). Não utilize os kits nem os reagentes fora das datas de validade. Após adicionar a mistura de reagentes, use a mistura dentro de uma hora. Armazene a mistura reativa entre 2 e 8 °C até estar pronto para preparar o PCR. Após descongelar, armazene a mistura de primers, a mistura de reagentes e o DNA de controle para extração e amplificação e o controle sem DNA entre 2 e 8 °C por um prazo máximo de 30 dias. Não recongele a mistura de primers, a mistura de reagentes, o DNA de controle para extração e amplificação e nem os controles positivos. Não misture os reagentes de lotes diferentes de kits. ADVERTÊNCIAS E PRECAUÇÕES 1. 2. Para uso diagnóstico in vitro Todo material de origem humana deve ser considerado potencialmente infeccioso. Os materiais-fonte (incluindo os controles) dos quais deriva este produto foram testados usando métodos aprovados pelo FDA para antígeno de superfície de